三門峽富通新能源生產(chǎn)銷售秸稈顆粒機(jī)、秸稈壓塊機(jī)等顆粒飼料生產(chǎn)機(jī)械設(shè)備。
1、代謝能的常規(guī)測(cè)定方法
代謝能的常規(guī)測(cè)定方法是采用代謝試驗(yàn),即給試禽飼喂待測(cè)飼料,根據(jù)飼料攝入量和排泄物量來計(jì)算飼料代謝能(ME),常用于測(cè)定飼料的表觀代謝能(AME)。
1.1飼喂方法
試禽以單只或一組為一個(gè)重復(fù),每種飼料設(shè)若干重復(fù)。前3d為適應(yīng)期,飼喂待測(cè)飼料,以排空消化道中以前的飼料食糜,正式期3~5d,自由采食和飲水,記錄飼料攝入量,同時(shí)收集排泄物,分析測(cè)定飼料和排泄物的能量,進(jìn)而計(jì)算飼料的AME值。對(duì)一些適口性較好的谷物籽實(shí)等,可直接使用單一飼料,對(duì)AME值無顯著影響,但應(yīng)添加少量礦物質(zhì)和維生素為宜;對(duì)一些養(yǎng)分不平衡、適口性差的飼料,若單一飼喂會(huì)引起試禽代謝失調(diào),則應(yīng)采用套算法,即用部分待測(cè)飼糧替代基礎(chǔ)飼糧,通過兩者的能值和待測(cè)飼料替代基礎(chǔ)飼糧的比例來計(jì)算待測(cè)飼料的AME,計(jì)算公式為:
套算法適合于測(cè)定仔雞、成年雞、產(chǎn)蛋雞飼料代謝能(Sibbald,1976; Farrell,1978),但雞的啄食使飼料容易飛濺出食槽,所以采用這種方法時(shí)雞的采食量不易準(zhǔn)確計(jì)量。家禽對(duì)于適口性較差的飼料采食量較低(Sibbald,1962),且不穩(wěn)定(McNab,1988),會(huì)影響代謝能的測(cè)定結(jié)果,但對(duì)于適口性很好的豆粕此影響則較小。
采用套算法測(cè)定飼料代謝能值時(shí),接近試雞的自然生產(chǎn)狀態(tài),試雞的采食量較大,對(duì)應(yīng)的食入能和排泄能的量也較大,內(nèi)源能的量在總的排泄能中所占比例相對(duì)較小。并且這種方法對(duì)試雞造成的應(yīng)激小,即對(duì)待測(cè)飼料的消化利用情況也較為穩(wěn)定,故測(cè)得的AME值與TME值接近,并且測(cè)定值變化較小。套算法是研究和使用歷史最長(zhǎng)并被廣泛認(rèn)同的一種方法,其測(cè)定的各種飼料的AME值已形成了一個(gè)比較完整的體系。
1.2排泄物的收集方法
1.2.1全收法適合于單只或幾只試禽為一組的試驗(yàn),通過在禽籠下用集糞盤或鋪墊上塑料布來承載并收集排泄物。收集時(shí)應(yīng)將排泄物中的飼料、羽毛和皮屑仔細(xì)揀出避免污染排泄物。這種方法對(duì)試禽的應(yīng)激小,飼養(yǎng)方式最接近生產(chǎn)條件,還可結(jié)合飼養(yǎng)試驗(yàn)進(jìn)行。但試禽采食時(shí)會(huì)使飼料濺灑損失,或黏附在集糞盤或塑料布上,因此這種方法很難準(zhǔn)確的收集全部的排泄物,采食量不好測(cè)定。而且,此法工作量大,費(fèi)時(shí)費(fèi)力,測(cè)定速度較慢,成本高。
針對(duì)以上的缺點(diǎn),Sibbald等(1986)通過將一種集糞袋粘在雞泄殖腔上來解決污染問題,但此法收集的排泄物量較集糞盤少,因?yàn)榧S袋易脫落,且集糞袋內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間高溫使排泄物分解。李杰等(1984)給雞泄殖腔縫瓶蓋,用塑料瓶收集排泄物,效果很好,但對(duì)試雞有一定的應(yīng)激。周英華等(1991)將李杰等的方法改進(jìn),將塑料瓶換成塑料袋,此法操作簡(jiǎn)便,收糞效果較好,已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于家禽飼料代謝能的測(cè)定中。Adeola等(1997)對(duì)此法進(jìn)一步改進(jìn),在縫瓶蓋前對(duì)鴨泄殖腔周圍進(jìn)行局部麻醉,降低了應(yīng)激。
1.2.2指示劑法在試禽的飼糧中定量加入一種指示劑,假定它不能從外界環(huán)境(空氣、水、土壤)中攝入,且是一種對(duì)動(dòng)物無毒的惰性物質(zhì),它在家禽的消化道內(nèi)移動(dòng)的過程中不發(fā)生消化吸收和增減變化,并且均勻移行、分布和排出,通過此指示劑的濃度變化來測(cè)定代謝能,其計(jì)算公式如下:
飼料總能消化率=l -(飼料中指示劑含量/糞中指示劑含量)×(糞中能量含量/飼料中能量含量)×l00%
飼料代謝能(kj/kg)=飼料總能x飼料總能消化率
常用的指示劑分外源指示劑和內(nèi)源指示劑。三氧化二鉻是最常用的外源指示劑,常用于測(cè)定AME,用量為0.3%~0.5%。酸不溶灰分(AIA)是常用的內(nèi)源指示劑。
因?yàn)橹甘緞┑幕厥章室话憔陀?00%,增加了試驗(yàn)誤差,影響代謝能測(cè)定的準(zhǔn)確性。因此指示劑的使用中要注意,含外源指示劑的飼料一定要混合均勻,含內(nèi)源指示劑的飼料要求原料雜質(zhì)含量低。但由于可以通過測(cè)定部分排泄物中指示劑的比例推算出飼料的代謝能,因而此法可以減少收集全部排泄物的麻煩,縮短了排泄物收集的時(shí)間,大大減少了測(cè)定的工作量,因此節(jié)約了大量的人力、物力,在家禽飼料代謝能的評(píng)定中被越來越多的使用。
1.2.3回腸末端食糜法回腸食糜法是在試糧中加入定量的指示劑,在試禽食入待測(cè)飼料一定時(shí)間后,將試禽屠宰,迅速分離小腸,收集小腸末端(回腸末端)的食糜,根據(jù)食糜中的指示劑的含量來計(jì)算待測(cè)飼料的代謝能值。加拿大Scott等(1998)用收集雞回腸食糜的方法,測(cè)定大麥、小麥的表觀代謝能,從而提高測(cè)定的準(zhǔn)確性,近年來引起了越來越多的動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)研究者的關(guān)注。唐玲等(2000)以酸不溶灰分做指示劑,用目腸末端食糜法測(cè)定了3種不同來源的玉米的代謝能值,證實(shí)3種玉米的營養(yǎng)成分不同,取得了較好的效果。此法測(cè)定代謝能的計(jì)算公式如下:
習(xí)糧回腸表觀代謝能(MJ/kg)=日糧總能一(回腸食糜的總能×日糧中指示劑的含量/回腸食糜中指示劑的含量)
這種方法避免了體外收集排泄物時(shí)飼料、羽毛和皮屑等對(duì)排泄物的污染,提高了測(cè)定的準(zhǔn)確性。缺點(diǎn)就是指示劑引入了誤差;試驗(yàn)動(dòng)物不能重復(fù)使用。
2、代謝能的快速測(cè)定法
2.1真代謝能(TME)快速測(cè)定
針對(duì)傳統(tǒng)自由采食方法的缺點(diǎn),Sibbald (1975)提出了強(qiáng)飼法。其基本過程為:在試驗(yàn)開始時(shí),試驗(yàn)雞的消化道處于排空狀態(tài),此時(shí)通過強(qiáng)飼一定數(shù)量的飼料,經(jīng)一定時(shí)間后,消化道再次處于排空狀態(tài),準(zhǔn)確全部收集此期間的排泄物,可代表飼料中未被消化利用的部分;若不強(qiáng)飼飼料時(shí),收集的排泄物可代表來自內(nèi)源的部分。根據(jù)食入和排出的能量及內(nèi)源能值,即可計(jì)算飼料的TME值。此法將已知重量的飼料通過玻璃管、塑料管或不銹鋼管(強(qiáng)飼器)直接注入試禽嗉囊或膨大部,分為干法(粉料制;虿恢屏V苯訌(qiáng)飼)和濕法(粉料加水拌成糊狀強(qiáng)飼)。
該法作為近年來在評(píng)價(jià)家禽代謝能含量方面的一個(gè)突出的創(chuàng)新,受到越來越多的研究者的重視,但此法仍存在一些缺點(diǎn):饑餓和強(qiáng)飼對(duì)雞只的應(yīng)激都很大;只強(qiáng)飼一種飼料,沒有考慮各種飼料原料對(duì)能量利用的協(xié)同和拮抗作用;饑餓排空和收集排泄物的時(shí)間可能不足;強(qiáng)飼量低,不能代表雞在正常情況下的采食量。強(qiáng)飼量對(duì)代謝能的測(cè)定值影響較大,因?yàn)閺?qiáng)飼飼料數(shù)量相對(duì)較。ㄒ话阆喈(dāng)于體重的1%),所以在飼喂和排泄物收集時(shí)的微小誤差都會(huì)引起很大的偏差(Sibbald等,1976b),強(qiáng)飼量越大使試驗(yàn)誤差相對(duì)越小,但強(qiáng)飼量太大時(shí),會(huì)發(fā)生食糜倒流出口腔。Mohamed (1984)和Adeola (1997)對(duì)強(qiáng)飼法作了改進(jìn),分2次強(qiáng)飼動(dòng)物,使飼喂量達(dá)到體重的1.5%,并未發(fā)現(xiàn)嘔吐現(xiàn)象。McNab等(1988)給強(qiáng)飼公雞管飼飲水,測(cè)得的代謝能離差顯著降低,表明強(qiáng)飼應(yīng)考慮家禽的飲水。在饑餓排空和收集排泄物的時(shí)間問題上,Sibbald等(1986)與McNab等(1988)推薦雞代謝能測(cè)定采用48h+48h模式,目前世界各國普遍采用這種模式。
雖然有以上的缺點(diǎn)存在,強(qiáng)飼法還是有一些傳統(tǒng)測(cè)定方法無法比擬的優(yōu)點(diǎn):可以避免飼料適口性對(duì)采食量的影響,受試雞和飼糧組成影響不大,可測(cè)定單一飼料的代謝能值,因試驗(yàn)雞以單只為重復(fù),排泄物收集相對(duì)準(zhǔn)確,且便于操作,節(jié)省時(shí)間,測(cè)定結(jié)果可靠,重復(fù)性好,目前為營養(yǎng)學(xué)界所廣泛應(yīng)用。
2.2 AME快速測(cè)定
AME的快速測(cè)定法由Farrell (1978)提出,該法通過3周或更長(zhǎng)的時(shí)間訓(xùn)練家禽在th內(nèi)采食顆粒料達(dá)正常ld的采食料量,其它程序與常規(guī)法相同。但是要達(dá)到試禽正常的采食量實(shí)際上很難。Parsons (1984)將采食時(shí)間延長(zhǎng)到4h,可以達(dá)到要求的采食量,之后也有人對(duì)此法改進(jìn)。Macleod (1991)認(rèn)為當(dāng)采食量相同時(shí),強(qiáng)飼和訓(xùn)練采食測(cè)得的表觀代謝能和真代謝能不存在方法間的差異。該法雖然避免了強(qiáng)飼對(duì)試禽的應(yīng)激,但不適合單一飼料,必須采用套算法,很難達(dá)到要求的采食量,且訓(xùn)練需要一定的時(shí)間,沒有被營養(yǎng)界廣泛采用。
2.3雙指標(biāo)中速測(cè)定法(DSQ法)
此法由Du preez (1984)發(fā)明,最大的優(yōu)點(diǎn)是可同時(shí)測(cè)定同一飼料的AME和TME值,所需時(shí)間比快速法長(zhǎng)但比傳統(tǒng)法短。此法也假定能量排泄量與采食量之間呈線性關(guān)系。過程為:將被測(cè)飼料與玉米基礎(chǔ)料混合(29.7:70.3)形成試驗(yàn)飼糧,加入指示劑三氧化二鉻。選10只成年雞自由采食2d后,選擇采食量最大的4只分成一組繼續(xù)自由采食;余下的6只雞分成兩組,采食量分別為自由采食量的40%和70%,飼喂2d。之后進(jìn)入3d的正試期,準(zhǔn)確記錄采食量并收糞。采用特制食槽降低飼料損失,在雞泄殖腔周圍皮膚縫塑料袋收糞,第2d收集的糞樣用作分析。被測(cè)飼料的TME用回歸系數(shù)來計(jì)算,公式如下:
TME=(I- b)GE
式中,b為排泄能量與采食量的回歸系數(shù),AME則仍按傳統(tǒng)法計(jì)算。Du preez (1984)用此法測(cè)定了6種飼料11個(gè)樣品的TME和AME,分別與Sibbald法和Farrell法進(jìn)行比較,Dso法測(cè)出的TME值的變異系數(shù)大大低于Sibbald法。
3、代謝能的體外測(cè)定方法
3.1回歸預(yù)測(cè)法
飼料中的纖維及組成、蛋白質(zhì)以及淀粉的含量均會(huì)影響ME的測(cè)定值,因此,同種飼料的不同品質(zhì)或同一成分的不同結(jié)構(gòu)和組成(如飼料所含粗纖維性質(zhì)不同)都將有不同的ME值。因此可以根據(jù)飼料的化學(xué)組成,如粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、淀粉、灰分(Ash)、粗纖維(CF)或中性洗滌纖維(NDF)等來建立代謝能的預(yù)測(cè)方程。研究表明,隨相關(guān)變量數(shù)量的增加,方程預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性有所提高,但如果引進(jìn)的變量與代謝能值相關(guān)性很低則會(huì)降低預(yù)測(cè)方程預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性。
根據(jù)化學(xué)成分預(yù)測(cè)飼料的代謝能,可以減少動(dòng)物試驗(yàn),降低成本,縮短時(shí)間,對(duì)家禽飼料配方、飼料質(zhì)量控制、對(duì)供銷人員迅速做出飼料供銷決策具有重要意義。利用他學(xué)成分分析結(jié)果來預(yù)測(cè)飼料代謝能值的研究已有幾十年的歷史,預(yù)測(cè)的回歸法雖然已有研究者在雞方面作了不少研究,并建立了一系列針對(duì)不同飼料建立的回歸方程,但目前還沒有形成一個(gè)非常完善的體系,尚沒有最佳的方程可以推薦。一些方程未與實(shí)測(cè)值比較,某些化學(xué)分析值變異很大,比較復(fù)雜,不易采用(陳代文,1997)。
3.2酶解法
酶解法是在體外模擬消化過程,測(cè)出可消化干物質(zhì)(DDM)或可消化蛋白質(zhì)(DCP)或體外消化能(IVDE),這些指標(biāo)與AME或表觀代謝凈能(AMEn)具有高度相關(guān)性,可用于估計(jì)或預(yù)測(cè)家禽飼料有效能。目前比較常用的是二階段體外消化技術(shù)。Furuya (1979)提出了此技術(shù),一開始是用于豬飼料的營養(yǎng)評(píng)估,即模擬豬胃(胃蛋白酶)和小腸(小腸液PIF)消化過程,來估測(cè)生長(zhǎng)豬干物質(zhì)和粗蛋白消化率。Clunies (1980)和Sakamoto等(1984)將此法應(yīng)用于測(cè)定家禽飼料的AMEn,并證明此法測(cè)出的消化率與母雞實(shí)測(cè)消化率相關(guān)性很好。此技術(shù)經(jīng)張子儀等(1995)加以改進(jìn),現(xiàn)已比較成熟。俞火明等(1991)用離體法估測(cè)了52種雞飼料的AME,并與生物學(xué)方法實(shí)測(cè)值相比較,二者的相關(guān)系數(shù)在0.96以上,達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。
酶活對(duì)此技術(shù)的影響較大,試驗(yàn)證明,PIF的酶活性受豬品種、月齡和采集部位的影響很大(張子儀等,1986)。另外,飼料成分對(duì)代謝能值的測(cè)定影響也很大,據(jù)Clunies等(1980)報(bào)道,飼料中脂肪含量過高會(huì)使體外消化能值偏低。這可能是由于飼料中脂肪的升高,使有限的小腸液內(nèi)的膽汁與脂酶的含量與活性相對(duì)降低,這使得飼料中的脂肪消化不完全,從而導(dǎo)致體外消化能降低(刁新平等,1989)。再者,試驗(yàn)條件對(duì)測(cè)定的結(jié)果也有一定的影響,刁新平、韓友文等(1989)對(duì)體外消化的時(shí)間、溫度和最適pH做過研究,由于家禽腸道相對(duì)較短,是否可以完全沿用前述方法中的其它測(cè)定條件還未見報(bào)道,仍需進(jìn)一步研究。酶法的優(yōu)點(diǎn)在于快速簡(jiǎn)便,測(cè)定結(jié)果重復(fù)性好,此法能很好的估計(jì)AMEn (IVDE與AMEn相關(guān)系數(shù)為0.87),但準(zhǔn)確性不如化學(xué)預(yù)測(cè)法高。
3.3近紅外光譜法
NIRS (Near-infrared Reflectance Spectroscopy)分析技術(shù)是20世紀(jì)70年代興起的有機(jī)物質(zhì)快速分析技術(shù)。盡管現(xiàn)代NIRS技術(shù)在飼料工業(yè)上的應(yīng)用起步較晚,但隨著光學(xué)、電子計(jì)算機(jī)等學(xué)科的不斷發(fā)展,硬件的不斷完善,軟件版本的不斷更新,使該技術(shù)的穩(wěn)定性和實(shí)用性不斷提高,應(yīng)用領(lǐng)域也日漸拓寬。
該法是根據(jù)樣品中的有機(jī)物對(duì)近紅外光在特定波長(zhǎng)處有特征吸收的原理,測(cè)定有機(jī)物的含量。吸收光度值隨待測(cè)樣品中分析物濃度的改變而呈線性變化,二者之間的關(guān)系遵循比爾定律。其分析過程分定標(biāo)和預(yù)測(cè)2個(gè)步驟。即選取一批定標(biāo)樣品(一般至少50個(gè)),用生物學(xué)方法測(cè)定其代謝能值及其在近紅外光譜區(qū)吸收的光密度值,通過回歸計(jì)算,建立定標(biāo)方程,然后測(cè)定待測(cè)樣品近紅外光譜區(qū)吸收的光密度值,用定標(biāo)方程預(yù)測(cè)其代謝能。
目前已經(jīng)有不少的營養(yǎng)學(xué)家在單胃動(dòng)物飼料有效能值、氨基酸含量與利用率以及反芻動(dòng)物飼料營養(yǎng)價(jià)值評(píng)定上取得了可喜的成果。Valdes和Lessen (1992a,b)已將NIRS技術(shù)應(yīng)用于測(cè)定全價(jià)和單一飼料的代謝能值。但影響近紅外光譜分析準(zhǔn)確性的因素很多,該技術(shù)尚不完全成熟。理論上講,定標(biāo)樣品越多越能反映被測(cè)飼料群體的常態(tài)分布,但數(shù)量太多會(huì)增加工作量,給定標(biāo)方程的制定帶來困難。因此,合理確定定標(biāo)樣品數(shù)量非常重要。另外,無論定標(biāo)還是測(cè)定,均應(yīng)保證樣品粉碎粒度的均勻和一致性。Villamide (1998)等指出被測(cè)樣品的表面、顆粒大小及分布均會(huì)影響分析的準(zhǔn)確性。
4、結(jié)論
家禽飼料代謝能的測(cè)定方法有很多,全收法和指示劑法雖然不能準(zhǔn)確的收集到全部的排泄物,影響了測(cè)定的準(zhǔn)確性,但它們應(yīng)用時(shí)間較長(zhǎng),積累的數(shù)據(jù)多,還將在一段時(shí)間內(nèi)繼續(xù)應(yīng)用下去。回腸食糜法可以避免排泄物的污染問題,提高了測(cè)定的準(zhǔn)確性,有較好的應(yīng)用前景。強(qiáng)飼法已經(jīng)被營養(yǎng)學(xué)界廣泛應(yīng)用,但該法對(duì)試禽的應(yīng)激和內(nèi)源能的真實(shí)排泄量還有待進(jìn)一步研究,另外,此法多采用成年的公雞做為試禽,測(cè)得的數(shù)據(jù)能否完全應(yīng)用于生長(zhǎng)仔雞也有待探討;貧w預(yù)測(cè)法對(duì)飼料的快速檢測(cè)具有重要意義,但與代謝能相關(guān)的預(yù)測(cè)成分尚需更多的完善。酶法技術(shù)較為成熟,但在家禽試驗(yàn)中的一些測(cè)定條件還有待進(jìn)一步研究。近紅外光譜法受到越來越多的關(guān)注,如果可以均勻樣品狀態(tài),提高化學(xué)分析和生物學(xué)測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性,建立更加有代表性的定標(biāo)方程,此法必將得到更加廣泛的應(yīng)用。
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